Kit RT-qPCR directe
Descripció del kit:
◮ El kit RT-qPCR directe, que utilitza Foreasy Reverse Transcriptase i Foreasy HS Taq DNA Polymerase desenvolupat per Foregene, amb un tampó de reacció únic, fa que aquest kit tingui una gran resistència i compatibilitat, i pot provar directament la reacció utilitzant el sistema Foregene Lysis com a plantilla.Aquest kit es pot sol·licitar per al desenvolupament de kits de detecció d'àcids nucleics COVID-19 i altres bacteris patògens.
Descripció
El kit RT-qPCR directe proporciona un tampó RT-qPCR empaquetat per separat i un enzim d'alta eficiènciabarreja (Taq、M-MLV、RI), cosa que fa que sigui convenient per a la creació de kits i sistemes de fonsajust, dins d'una simple verificació.
Especificacions
500T, 50.000T
Components del kit
| Contingut del kit (sistema de reacció de 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Mescla d'enzims directes | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2 × Buffer RT-qPCR directe | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instrucció | 1 | 1 |
Etapes de funcionament
Abans de preparar els reactius, tots els reactius del kit s'han de descongelar a temperatura ambient i barrejar-los suaument.
A: Prepara't of plantilla i reactiu
1. Prepareu la plantilla d'ARN preparada (es recomana utilitzar el kit de la sèrie Foregene Total RNA Isolation Kit per extreure i purificar la plantilla d'ARN) o producte de craqueig de mostres (es recomana utilitzar el sistema Foregene Lysis), cebadors específics (10 μM) i altres consumibles rellevants, instrument.
2. Poseu el tampó RT-qPCR 2 × directe, ddH2O lliure de RNasa i 20 × colorant de referència ROX (si és'cal) a la caixa amb gel, fent que es fonguin de manera natural i es barregin suaument.
B: Prepara't of RT-qPCR sistema
Taula 1 : Prepara't of RT-qPCR ssistema
| Component | Volum | Concentració final |
| 2 × Buffer RT-qPCR directe | 10 μl | 1× |
| Mescla d'enzims directes | 1μL | |
| Primer primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Primer invers (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Plantilla (ARN o lisat) | X μL | |
| 20 × Colorant de referència ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volum total | 20μL |
C: Conjunt el RT-qPCR reacció programa
Taula 2 : RT-qPCR reaccionaron programa configuració (per exemple: dos-pas mètode)
| Pas | Temperatura | Temps | Cicles | Contingut | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Transcripció inversa |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Pre-desnaturalització | |
| 3 | 95℃ | 10 segons | 40-45 | Desnaturalització | |
| 60℃ | 30 segons 2* | Recuit/Extensió | |||
Emmagatzematge i vida útil
-El kit s'ha de guardar a -20± 5℃.El període de validesa és de 12 mesos.
-Evitar els cicles de congelació-descongelació repetits (<5 cicles).
