Kit ForeDirect RT-qPCR
Descripció del kit:
◮Per a l'amplificació directa d'ARN en temps real a partir de col·leccions de hisops sense processos de purificació d'ARN.Aquest kit completa els cicles qRT-PCR en una hora.La barreja enzimàtica és una barreja optimitzada de transcriptasa inversa, DNA polimerasa Taq d'inici en calent, inhibidor de RNasa.El tampó de reacció conté tots els components necessaris, inclosos els components del tampó optimitzat, Mg2+, dUTP i dNTP.
Descripció
El kit ForeDirect RT-qPCR està dissenyat per a l'amplificació directa d'ARN en temps real a partir de col·leccions de hisops sense processos de purificació d'ARN.Aquest kit completa els cicles qRT-PCR en una hora.La barreja enzimàtica és una barreja optimitzada de transcriptasa inversa, DNA polimerasa Taq d'inici en calent, inhibidor de RNasa.El tampó de reacció conté tots els components necessaris, inclosos els components del tampó optimitzat, Mg2+, dUTP i dNTP.
Especificacions
100T
Components del kit
| Agent d'alliberament d'àcids nucleics |
| Protector d'ARN |
| 2 × RT-qPCR tampó |
| Mescla d'enzims (Taq&M-MLV) |
| Instruccions |
Aplicació PCR
1. Un cop centrifugats breument els tubs de reacció de PCR, col·loqueu-los al dipòsit de mostres de l'instrument d'amplificació.
2. Protocol tèrmic
| Pas | Temperatura | Temps | Cicles | |
| 1 | Transcripció inversa | 50℃ | 15 minuts | 1 |
| 2 | Pre-desnaturalització | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Desnaturalització | 95℃ | 10 segons | 42 |
| 4 | Recuit/Extensió | 60℃ | 30 segons | |
Nota:El senyal fluorescent es va detectar immediatament després del pas d'extensió de cada cicle.
3. Després de configurar, deseu el fitxer i executeu el programa de reacció.
Etapes de funcionament
Abans de preparar els reactius, tots els reactius del kit s'han de descongelar a temperatura ambient i barrejar-los suaument.
Preparació de reactius
1. Prepareu la mescla d'alliberament d'àcids nucleics
| Component | Volum per mostra o control |
| Agent d'alliberament d'àcids nucleics | 5μl |
| Protector d'ARN | 0,5 μl |
2. Prepareu la barreja de reacció
| Component | Volum per mostra o control |
| 2 × RT-qPCR tampó | 15 μl |
| Mescla d'enzims (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
| Primers i sondes | 1μl |
Emmagatzematge i vida útil
-El kit s'ha de guardar a -20± 5℃.El període de validesa és de 12 mesos.
-Evitar els cicles de congelació-descongelació repetits (<5 cicles).
