Fabricant de la Xina per a una barreja de 2 × concentrada per a mostres no purificades PCR quantitativa en temps real Sonda múltiplex directa Qpcr Mix Plus U
L'organització manté el concepte de procediment "gestió científica, primacia d'alta qualitat i eficiència, comprador suprem per al fabricant de la Xina per a la barreja concentrada 2x per a mostres no purificades PCR quantitativa en temps real Sonda múltiplex directa Qpcr Mix Plus U, el nostre negoci es dedica a oferir als clients productes importants i segurs d'alta qualitat a un preu agressiu, fent que tots i cada client estiguin satisfets amb els nostres serveis.
L'organització manté el concepte de procediment “gestió científica, primacia d'alta qualitat i eficiència, comprador suprem perXina Taq DNA Polymerase i Qpcr, La nostra empresa té una força abundant i posseeix un sistema de xarxa de vendes constant i perfecte.Ens agradaria poder establir relacions comercials sòlides amb tots els clients nacionals i estrangers sobre la base dels beneficis mutus.
Principis de disseny d'imprimació de PCR en temps real
Primer i imprimació inversa
Per a la PCR en temps real, el disseny d'imprimació és molt important.Els primers estan relacionats amb l'especificitat i l'eficiència de l'amplificació per PCR i es poden dissenyar amb referència als principis següents:
- Longitud d'imprimació: 18-30 bp.
- Contingut de GC: 40-60%.
- Valor Tm: el programari de disseny d'imprimació, com ara Primer 5, pot donar el valor Tm de la imprimació.Els valors de Tm dels cebadors aigües amunt i aigües avall haurien de ser el més propers possible.També es pot utilitzar la fórmula de càlcul Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Quan es realitza la PCR, generalment es selecciona una temperatura per sota del valor Tm de l'imprimació de 5 °C com a temperatura de recuit (l'augment corresponent de la temperatura de recuit pot augmentar l'especificitat de la reacció de PCR).
- Primers i productes de PCR:
- La longitud del producte d'amplificació de la PCR del primer disseny és preferiblement de 100-150 pb.
- S'han d'evitar tant com sigui possible les imprimacions de disseny a l'àrea estructural secundària de la plantilla.
- Eviteu la formació de 2 o més bases complementàries entre els extrems 3′ dels cebadors aigües amunt i aigües avall.
- La base terminal del primer 3′ no pot estar present amb 3 G o C consecutius addicionals.
- Els primers en si no poden tenir estructures complementàries, en cas contrari es formarà una estructura de forquilla que afectarà l'amplificació de la PCR.
- L'ATCG s'ha de distribuir de la manera més uniforme possible en la seqüència d'encebadors i s'ha d'evitar la base terminal 3′ com a T.
Apèndix1: Cell DirectRT-qPCR Kit de componentspaquet de suplements t
1. Solució de lisi cel·lular
Solució de lisi cel·lular | |||
Components del kit (sistema de lisi de 24 pous/pou) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Partjo | Tampó CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampó ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartII | Esborrador d'ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Components del kit (sistema de reacció de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH lliure de RNasa2O | 1,7 ml × 2 |
Barreja de qPCR | ||
Components del kit (sistema de reacció de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × QPCR directe Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × Colorant de referència ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH lliure de RNasa2O | 1,7 ml | 10 ml |
L'organització manté el concepte de procediment "gestió científica, primacia d'alta qualitat i eficiència, comprador suprem per al fabricant de la Xina per a la barreja concentrada 2x per a mostres no purificades PCR quantitativa en temps real Sonda múltiplex directa Qpcr Mix Plus U, el nostre negoci es dedica a oferir als clients productes importants i segurs d'alta qualitat a un preu agressiu, fent que tots i cada client estiguin satisfets amb els nostres serveis.
Fabricant de la Xina perXina Taq DNA Polymerase i Qpcr, La nostra empresa té una força abundant i posseeix un sistema de xarxa de vendes constant i perfecte.Ens agradaria poder establir relacions comercials sòlides amb tots els clients nacionals i estrangers sobre la base dels beneficis mutus.
Principis de disseny d'imprimació de PCR en temps real
Primer i imprimació inversa
Per a la PCR en temps real, el disseny d'imprimació és molt important.Els primers estan relacionats amb l'especificitat i l'eficiència de l'amplificació per PCR i es poden dissenyar amb referència als principis següents:
- Longitud d'imprimació: 18-30 bp.
- Contingut de GC: 40-60%.
- Valor Tm: el programari de disseny d'imprimació, com ara Primer 5, pot donar el valor Tm de la imprimació.Els valors de Tm dels cebadors aigües amunt i aigües avall haurien de ser el més propers possible.També es pot utilitzar la fórmula de càlcul Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Quan es realitza la PCR, generalment es selecciona una temperatura per sota del valor Tm de l'imprimació de 5 °C com a temperatura de recuit (l'augment corresponent de la temperatura de recuit pot augmentar l'especificitat de la reacció de PCR).
- Primers i productes de PCR:
- La longitud del producte d'amplificació de la PCR del primer disseny és preferiblement de 100-150 pb.
- S'han d'evitar tant com sigui possible les imprimacions de disseny a l'àrea estructural secundària de la plantilla.
- Eviteu la formació de 2 o més bases complementàries entre els extrems 3′ dels cebadors aigües amunt i aigües avall.
- La base terminal del primer 3′ no pot estar present amb 3 G o C consecutius addicionals.
- Els primers en si no poden tenir estructures complementàries, en cas contrari es formarà una estructura de forquilla que afectarà l'amplificació de la PCR.
- L'ATCG s'ha de distribuir de la manera més uniforme possible en la seqüència d'encebadors i s'ha d'evitar la base terminal 3′ com a T.
Apèndix1: Cell DirectRT-qPCR Kit de componentspaquet de suplements t
1. Solució de lisi cel·lular
Solució de lisi cel·lular | |||
Components del kit (sistema de lisi de 24 pous/pou) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Partjo | Tampó CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampó ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartII | Esborrador d'ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Components del kit (sistema de reacció de 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH lliure de RNasa2O | 1,7 ml × 2 |
Barreja de qPCR | ||
Components del kit (sistema de reacció de 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × QPCR directe Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × Colorant de referència ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH lliure de RNasa2O | 1,7 ml | 10 ml |
Manuals d'instruccions: