L'enzim Taq d'arrencada en calent s'utilitza àmpliament.En comparació amb l'ADN polimerasa ordinària, l'enzim Taq d'inici en calent pot evitar eficaçment una mica d'amplificació inespecífica i la formació de dímers d'imprimació, i pot millorar eficaçment la taxa d'èxit de l'amplificació del gen objectiu.Especialment en el camp de les proves genètiques, l'enzim Taq d'arrencada en calent s'ha identificat com a estàndard obligatori a la indústria i no s'ha d'utilitzar l'ADN polimerasa ordinària.Com es pot veure a l'anterior, els enzims Taq d'arrencada en calent s'utilitzen àmpliament.Actualment, hi ha moltes marques d'enzims Taq d'arrencada en calent al mercat nacional, però no hi ha molts enzims Taq d'inici en calent d'alta qualitat.Davant de tants productes enzimàtics Taq d'inici en calent, com hem de triar?

1. Seleccioneu l'enzim Taq d'arrencada en calent amb una alta eficiència d'amplificació

L'eficiència de l'amplificació de la PCR està estretament relacionada amb el rendiment de l'enzim Taq.Després d'optimitzar un bon sistema de reacció enzimàtica Taq, l'eficiència d'amplificació és superior al 95% i el rang d'amplificació de la quantitat inicial de plantilla és ampli.Es pot obtenir una amplificació satisfactòria quan el contingut del gen objectiu és baix, i no és fàcil ser enverinat quan la quantitat de plantilla és alta i el període d'amplificació exponencial és llarg.Per a l'enzim Taq amb un rendiment baix, fins i tot si el sistema de reacció s'ha optimitzat moltes vegades, l'eficiència d'amplificació encara és inferior al 90%, la forma "S" de la corba d'amplificació no és òbvia, el pendent és petit i la corba és plana.Quan la quantitat de plantilla és baixa, no es pot amplificar, i quan la quantitat de plantilla és alta, l'efecte d'amplificació no és ideal.Per tant, la selecció d'ADN polimerases amb una alta eficiència d'amplificació és crucial per a l'èxit de la PCR i la qPCR.

2. Seleccioneu l'enzim Taq d'arrencada en calent amb un fort poder enzimàtic

El poder enzimàtic de l'enzim Taq està relacionat amb l'eficiència d'amplificació.En general, com més fort sigui el poder enzimàtic de l'enzim Taq d'inici en calent, més llarg serà el període de creixement exponencial de l'amplificació de PCR, més corba "en forma de S" típica, més alt és el valor del senyal de fluorescència i més adequat per a la detecció de PCR múltiple.Les ADN polimerases de marca amb un poder enzimàtic feble generalment només poden suportar reaccions 2-plex.Quan es fan reaccions de 3 plex, la corba d'amplificació és baixa, el valor del senyal de fluorescència és baix i no hi ha una corba d'amplificació típica, de manera que els resultats són difícils de jutjar.

3. Seleccioneu un enzim Taq d'arrencada en calent amb alta sensibilitat

En termes generals, l'ADN polimerasa té una alta eficiència d'amplificació i una alta sensibilitat, però també hi ha inconsistències.Si l'abundància del gen objectiu de la mostra a amplificar és baixa, es recomana provar la sensibilitat d'amplificació de l'enzim Taq.El mètode de detecció més comú és dur a terme una dilució de gradient de 10 o 5 vegades del fragment de plasmidi del gen objectiu, realitzar la detecció de PCR a la dilució més baixa i seleccionar l'enzim Taq d'inici en calent amb una sensibilitat de detecció més alta.

A partir de l'anterior, es pot veure que els investigadors han de triar segons els seus propis requisits experimentals i condicions de finançament.El millor és fer un experiment d'amplificació de dilució de gradient per detectar l'eficiència i la sensibilitat de l'amplificació de l'enzim Taq d'arrencada en calent.

Un exemple de Foregene's Taq DNA polimerasa:

Foreasy HS Taq DNA polimerasa

Descripció

Foreasy HS Taq DNA Polymerase és una DNA polimerasa expressada en bacteris d'enginyeria Escherichia coli mitjançant tecnologia de recombinació gènica.L'enzim es combina amb un buffer de reacció únic, que fa que el producte sigui molt resistent i compatible, i pot utilitzar directament el lisat de mostra (sistema Foregene Lysis) com a plantilla per a reaccions de detecció.

Aplicació

Detecció de PCR qualitativa i PCR quantitativa de plantilles purificades i plantilles no purificades.

Control de qualitat

1.No s'ha detectat cap activitat nucleasa exògena

2.Mètode PCR per detectar DNA genòmic residual sense host

3. Pot amplificar eficaçment gens d'una sola còpia en el genoma humà

4. Emmagatzemar a temperatura ambient durant una setmana, sense canvis d'activitat evidents

Detalls del producte: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/