-
PCR, PCR múltiple, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR(1)– PCR
PCR, PCR múltiple, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR(1)– PCR Ordenarem els conceptes, passos i detalls de diverses PCR Ⅰ.La reacció en cadena de la polimerasa de PCR, anomenada PCR, és una tecnologia biològica molecular que s'utilitza per augmentar fragments d'ADN específics.Es pot considerar un...Llegeix més -
Principi experimental qRT-PCR
RT-qPCR es desenvolupa a partir de la tecnologia PCR ordinària.Afegeix productes químics fluorescents (tints fluorescents o sondes fluorescents) al sistema de reacció de PCR tradicional, i detecta el procés de recuit i extensió de la PCR en temps real segons els seus diferents mecanismes luminescents.Senyal fluorescent...Llegeix més -
Resum detallat del mètode d'optimització del sistema de reacció experimental RT-PCR
Ⅰ.Augmentar la sensibilitat del sistema de reacció: 1. Separar ARN d'alta qualitat: la síntesi d'ADNc reeixida prové d'ARN d'alta qualitat.L'ARN d'alta qualitat hauria de garantir almenys un total més llarg i no conté inhibidors que no continguin enzims de registre, com ara EDTA o SDS.La qualitat...Llegeix més -
Com assegurar un rang raonable de valors Ct per als experiments de qPCR
El valor Ct és la forma de presentació de resultats més important de la PCR quantitativa fluorescent.S'utilitza per calcular les diferències d'expressió gènica o el nombre de còpies gèniques.Aleshores, quin es considera raonable el valor Ct de la quantificació de la fluorescència?Com garantir el rang efectiu del valor Ct?Què és Ct...Llegeix més -
Presta atenció als detalls següents per duplicar la taxa d'èxit del teu experiment RT-qPCR!
La RT-qPCR és l'experiment bàsic de la biologia molecular i tothom n'ha d'estar familiaritzat.Inclou principalment tres passos: extracció d'ARN, transcripció inversa a ADNc i PCR quantitativa fluorescent en temps real.No ajuda, què està passant?És probable que hi hagi un problema amb...Llegeix més -
Extracció d'ARN, el 260/230 és particularment baix i el valor ct de l'execució de pcr és molt alt.Com solucionar-ho?
La baixa relació d'A260/A230 sol ser causada per impureses amb la màxima longitud d'ona d'absorció a 230 nm.Vegem què inclouen aquestes impureses: Contaminants comuns Longitud d'ona d'absorció Efecte de relació Proteïnes ~230 nm i 280 nm Reducció simultània d'A 260 /A 280 i A 260 /A ...Llegeix més -
PCR quantitativa fluorescent (qPCR) – disseny d'imprimació
En els experiments de qPCR, el disseny d'imprimació també és un enllaç molt important.Si els primers són adequats o no està estretament relacionat amb si l'eficiència d'amplificació arriba a l'estàndard, si els productes amplificats són específics i si els resultats experimentals estan disponibles.Llavors, com fer...Llegeix més -
Additius comuns en reaccions de PCR i les seves funcions
Crec que tothom es trobarà sempre amb tal o tal problema a l'hora de fer reaccions de PCR, però la majoria d'ells es poden classificar en dos problemes principals: Massa poca amplificació de la plantilla del gen (amplificació);Massa amplificació de gens no objectiu.L'ús d'additius és una de les estratègies habituals...Llegeix més -
Un resum de 45 fàrmacs de teràpia gènica que s'han comercialitzat arreu del món
Els gens són les unitats genètiques bàsiques que controlen els trets.Excepte els gens d'alguns virus, que estan compostos per ARN, els gens de la majoria d'organismes estan compostos per ADN.La majoria de les malalties dels organismes són causades per la interacció entre els gens i el medi ambient.La teràpia gènica pot curar essencialment...Llegeix més -
A l'era de la teràpia amb ARN, qui pot convertir-se en el "nou estimat" de la indústria |Inventari anual
Font: WuXi AppTec Els darrers anys, el camp de la teràpia d'ARN ha mostrat una tendència explosiva: només en els últims 5 anys, 11 teràpies d'ARN han estat aprovades per la FDA, i aquest nombre fins i tot supera la suma de teràpies d'ARN aprovades anteriorment!En comparació amb les teràpies tradicionals, la teràpia d'ARN pot...Llegeix més -
Àcid nucleic extret!Però aquest ADN (ARN) és l'ADN (ARN) que t'imaginaves?
Quant saps Sobre l'extracció d'àcids nucleics L'inici i el final de l'àcid nucleic purificat Tot és difícil al principi, l'àcid nucleic purificat és el més Iniciació d'experiments moleculars, per a experiments posteriors L'èxit o el fracàs té un impacte crucial.Traça/ultratraça UV...Llegeix més -
7 min: de la cèl·lula de placa de 96 pous a RT-qPCR
Quant de temps són 7 minuts?Són 420 segons.Què puc fer en 7 minuts?És una tassa de te, escoltant una cançó;és l'alegria de passar per la classe, però l'angoixa abans que el teló s'allunyi....Llegeix més