El naixement de la PCR
PCR (reacció en cadena de la polimerasa)
Han passat més de 30 anys des de la invenció de la reacció en cadena de la polimerasa.Durant més de 30 anys, després que nombrosos estudiosos d'arreu del món continuïn complementant i millorant, la tecnologia PCR s'ha convertit en el mètode d'investigació bàsica més àmpliament utilitzat i més important en tot el camp de les Ciències de la Vida.
El TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, etc. desenvolupat sobre la base de l'àmplia aplicació de la tecnologia PCR tradicional, així com el recentment sorgit Digital PCR (PCR digital), han enriquit molt els mètodes d'investigació de la majoria dels investigadors científics i han accelerat molt el procés de desenvolupament de les Ciències de la Vida modernes, especialment la biologia molecular, ha fet grans contribucions a l'estudi de la vida i la naturalesa de la humanitat.
Defectes de la tecnologia PCR tradicional
Separació d'àcids nucleics complexos iextracció:
★ Tecnologia PCR tradicional: necessària
★ Tecnologia derivada de la PCR: necessària
★ Mostres d'ADN i ARN: grans diferències, requisits de funcionament difícils
★ Riscos corporals: els reactius tòxics perjudiquen l'organisme
La tecnologia PCR tradicional i la tecnologia derivada tenen un requisit previ: separació i purificació d'àcids nucleics
Qualsevol mostra biològica ha de passar per una sèrie de processaments complicats i tediosos de mostres per obtenir mostres d'àcid nucleic que compleixin els requisits de la tecnologia PCR.
La separació i extracció d'ADN i ARN ha estat sempre una tasca bàsica que els investigadors científics rellevants han de repetir cada dia.
A causa de les grans diferències entre mostres, els processos de separació i extracció d'ADN i ARN també són molt diferents.Aquest treball requereix un alt nivell de competència tècnica per als operaris.Les tècniques tradicionals de separació i extracció requereixen un contacte a llarg termini amb alguns reactius químics altament tòxics.Causarà danys irreversibles al cos de l'operador, i fins i tot provocarà danys directes durant l'experiment.
Al mateix temps, per a aquells que disposen d'un gran nombre de mostres per estudiar, la separació i l'extracció d'àcids nucleics és una tasca laboriosa.
Els kits d'aïllament i extracció d'àcids nucleics al mercat ja són madurs i hi ha moltes marques, però són aproximadament els mateixos.Tant si es tracta d'un kit centrífug de columna de membrana de gel de sílice com d'un kit de mètode de perles magnètiques, triga molt de temps i és costós.A més del cost del kit, també hi ha requisits especials per a l'equip de laboratori.L'estació de treball automatitzada que s'utilitza en el mètode de perles magnètiques és un equip de gran valor molt típic de gran escala, que suposa una despesa enorme per al laboratori.
En resum
Abans de realitzar experiments de PCR, el pretractament de les mostres és un maldecap inevitable per als investigadors.Com resoldre aquest problema i si es poden realitzar experiments de PCR sense la separació i extracció d'àcids nucleics sempre ha estat el pensament de la majoria dels investigadors científics i del personal del laboratori clínic.
Solució de Foregene
Després d'anys d'investigació minuciosa sobre la tecnologia Direct PCR i els kits relacionats, Forgene va superar amb èxit molts colls d'ampolla i va aconseguir PCR directa per a molts tipus de mostres diferents amb una forta resistència i adaptabilitat, cosa que va permetre als investigadors desfer-se de la feixuga i perillosa separació i extracció d'àcids nucleics.Això reduirà considerablement la intensitat laboral de tothom, accelerarà el procés d'experimentació i estalviarà costos de recerca i proves científiques.
La comprensió i el coneixement de DirectPCR de Forgene
En primer lloc, la tecnologia DirectPCR és una tecnologia de PCR directa per a diversos teixits de mostres biològiques.Sota aquesta condició tècnica, no cal separar i extreure els àcids nucleics, i la mostra de teixit s'utilitza directament com a objecte i s'afegeixen els cebadors del gen objectiu per a la reacció de PCR.
En segon lloc, la tecnologia DirectPCR no només és una tecnologia tradicional d'amplificació de plantilla d'ADN, sinó que també inclou PCR de transcripció inversa de plantilla d'ARN.
En tercer lloc, la tecnologia DirectPCR no només realitza directament reaccions de PCR qualitatives rutinàries en mostres de teixit, sinó que també inclou reaccions qPCR en temps real, que requereixen que el sistema de reacció tingui una forta capacitat per resistir la interferència de fluorescència de fons i antagonitzar els extintors de fluorescència endògens.
En quart lloc, les mostres de teixit dirigides per la tecnologia DirectPCR només requereixen l'alliberament de plantilles d'àcid nucleic i no eliminen proteïnes, polisacàrids, ions de sal, etc. que interfereixen amb la reacció de PCR.Això requereix que la polimerasa d'àcid nucleic i la barreja de PCR del sistema de reacció tinguin una excel·lent antireversibilitat i adaptabilitat, i pot garantir l'activitat enzimàtica i la precisió de la replicació en condicions complexes.
En cinquè lloc, les mostres de teixit dirigides per la tecnologia DirectPCR no han estat sotmeses a cap tractament d'enriquiment d'àcids nucleics, i la quantitat de plantilla és molt petita, la qual cosa requereix una sensibilitat i una eficiència d'amplificació extremadament elevades del sistema de reacció.
Conclusió
La tecnologia DirectPCR és un dels desenvolupaments tecnològics i innovacions més importants dels darrers 30 anys des del naixement de la tecnologia PCR.Forgene ha estat i continuarà sent un pioner i innovador d'aquesta tecnologia.
La perspectiva d'aplicació de la tecnologia DirectPCR és molt àmplia.La millora contínua i la promoció d'aquesta tecnologia suposarà, de ben segur, canvis subversius a la investigació científica i al treball d'inspecció.Aquesta és una revolució tecnològica PCR.
Hora de publicació: 21-feb-2017
