Introducció:
L'ARN, nom científic àcid ribonucleic, la seva abreviatura prové de RiboNucleic Acid, és un tipus d'àcid nucleic format per la connexió d'almenys desenes de ribonucleòtids mitjançant enllaços fosfodièster.
La premissa d'explorar l'ARN és extreure ARN total lliure de contaminació, i el principi bàsic de l'extracció d'ARN es pot resumir de la següent manera:
1. Primer trencar les cèl·lules
2. Després elimina les impureses macromoleculars (proteïnes, lípids, ADN, etc.)
3. Finalment, l'ARN es precipita mentre s'eliminen sals i dissolvents orgànics, i es purifica encara més l'ARN
Passat i present del mètode d'extracció
La primera generació del mètode d'extracció d'ARN és el mètode de precipitació TRIzol (els reactius utilitzats inclouen isotiocianat de guanidina, fenol, cloroform, etc.) inventat per un avi anomenat Piotr Chomczynski i l'àvia Nicoletta Sacchi, perquè aquest invent permet l'extracció d'ARN de manera ràpida i senzilla, des de llavors va començar l'augment de la investigació de l'ARN.
Més tard, l'avi va vendre aquesta patent a Invitrogen, i Invitrogen va promoure aquest mètode al món i es va convertir en un mètode molt utilitzat.
Més tard, Invitrogen va ser adquirit per Thermo!
Producte representatiu: reactiu TRIzol d'Invitrogen
Tanmateix, el mètode de precipitació TRIzol requereix múltiples precipitacions i extracció d'ARN, i els reactius utilitzats són tòxics i triguen molt de temps a funcionar.
Per tant, va néixer el mètode de purificació d'enzims de columna de segona generació, utilitzant membrana de gel de sílice com a material específic d'adsorció d'àcids nucleics per maximitzar la recuperació de l'ARN a la mostra mentre s'eliminaven altres impureses.
El mètode de segona generació simplifica l'operació sobre la base d'un rendiment estable, redueix el factor de risc i millora l'eficiència de l'extracció d'ARN.
Productes representatius: QIAGEN RNeasy i la majoria dels productes nacionals
Tanmateix, tant els mètodes de primera com de segona generació requereixen l'ús de DNasa per eliminar la contaminació d'ADN, la qual cosa comporta alguns inconvenients als experiments posteriors.La DNasa residual reduirà l'eficiència de la transcripció inversa i reduirà la síntesi d'ADNc de la primera cadena, afectant així la precisió dels resultats.
Per tant, el mètode d'extracció de tercera generació s'optimitza a partir de la segona generació.L'experiment no necessita afegir cap enzim, i l'ARN es pot obtenir fàcilment amb només dues columnes.
Columna 1: Columna de neteja d'ADN per netejar l'ADN
Columna 2: la columna només d'ARN adsorbeix i recupera específicament l'ARN
Una operació tan senzilla no només estalvia temps, sinó que també facilita el funcionament dels experiments aigües avall!
Productes representatius: QIAGEN RNeasy Plus iForegeneProductes de la sèrie de purificació d'ARN
（RNeasy Plus）
（de ForegeneKit d'aïllament d'ARN total de plantes)
T'ho dic en silenci!El kit d'ARN de Foregene també presenta un esborrador de RNasa súper fàcil d'utilitzar, que pot eliminar completament 400 μg d'RNasa de la superfície sòlida en 1 minut, sense afegir cap substància tòxica al cos humà.
Imatge1: Quadre de comparació de processos operatius
Els productes de Foregene poden completar l'extracció d'ARN en només dues cançons, no feu que els altres estiguin gelosos del progrés del vostre experiment!
Imatge2:Eresultats experimentals gràfic de comparació
La primera generació (1: TRIzol)
La segona generació (2: RNeasy de QIAGEN)
La tercera generació (3: RNeasy plus de QIAGEN, 4: Foregene)
Imatge3: gràfic qPCR (gràfic de corba d'amplificació)
La primera generació (verd significa TRIzol -, vermell significa TRIzol +)
La segona generació (blau cel significa QIAGEN RNeasy-, vermell significa QIAGEN RNeasy +)
La tercera generació (blau significa QIAGEN RNeasy plus, verd significa Foregene)
(Nota: el gràfic de qPCR "-" indica que no s'ha afegit DNasa i no s'ha eliminat la contaminació d'ADN. Per tant, la TC és més alta i el resultat no és precís; "+" indica que s'ha afegit DNasa i s'ha eliminat la contaminació d'ADN, el resultat és precís)
Cada actualització tècnica significa que el funcionament de l'experiment es desenvolupa en una direcció més senzilla i fàcil d'utilitzar.
Foregene pretén ajudar a més investigadors científics a estalviar temps i costos experimentals, obtenir resultats experimentals d'alta qualitat i crear conjuntament èxits de recerca científica més valuosos.
Hora de publicació: 09-jul-2021
