• facebook
  • linkedin
  • youtube

1: Substituïu els subministraments experimentals a temps

notícies 812 (1) 

Configura el control negatiu (NTC) i repeteix-ho moltes vegades.Un cop es trobi que hi ha contaminació del producte de PCR al laboratori, substituïu tots els subministraments experimentals a temps.Com ara: tornar a diluir i preparar els primers, tornar a esterilitzar la punta de la pipeta, el tub EP, ddH2O, etc., substituir-lo per una pipeta nova i demanar prestat temporalment altres laboratoris per realitzar experiments de PCR.El laboratori contaminat s'ha de ventilar i irradiar amb raigs ultraviolats fins que s'elimini la contaminació del producte de PCR abans de continuar amb l'experiment.

2: Amplieu el temps d'exposició UV

notícies 812 (2)

Val la pena assenyalar que per eliminar la contaminació d'ADN, la radiació ultraviolada regular s'ha d'allargar 2 hores de l'habitual.Tot i així, l'efecte de la irradiació UV en l'eliminació de petits fragments (per sota de 200 pb) de contaminació d'ADN encara no és bo.

La longitud d'ona ultraviolada (nm) és generalment de 254/300 nm, i n'hi ha prou per irradiar durant 30 minuts.Cal tenir en compte que a l'hora d'escollir UV per eliminar la contaminació dels productes de PCR residuals, s'ha de tenir en compte la durada del producte de PCR i la distribució de bases en la seqüència del producte.La irradiació UV només és efectiva per a fragments llargs per sobre de 500 pb i té poc efecte en fragments curts.

Durant la irradiació UV, les bases de pirimidines del producte de PCR formaran dímers.Aquests dímers poden acabar l'extensió, però no totes les pirimidines de la cadena d'ADN poden formar dímers, i la irradiació UV també pot trencar els dímers..El grau de formació del dímer depèn de la longitud d'ona UV, del tipus de dímer de pirimidina i de la seqüència de nucleòtids adjacents al lloc del dímer.Per tant, si els fragments amplificats per PCR són petits, es recomana utilitzar el sistema de contaminació del producte anti-PCR UNG.

3: Eliminadors de contaminació d'ADN d'ús habitual

notícies 812 (3)

Els aerosols es generen fàcilment quan s'afegeixen pipetes, cosa que és difícil d'evitar, i s'instal·larà ràpidament.Per tant, és sens dubte una bona opció utilitzar amb freqüència depuradors especials de contaminació per ADN per evitar la propagació de la contaminació per ADN.

4: Utilitzeu el sistema anticontaminació UNG

notícies 812 (4)

Després d'eliminar la contaminació del producte PCR, el laboratori de proves pot utilitzar el sistema de contaminació del producte anti-PCR UNG per evitar la contaminació del producte PCR.Als laboratoris generals, podeu realitzar particions experimentals senzilles, separar estrictament l'àrea de productes de PCR d'altres àrees, establir determinades normes i regulacions de laboratori i realitzar una formació rellevant per evitar que es produeixi la contaminació del producte PCR.

Recomanacions: establir un laboratori de PCR raonable, mantenir un bon entorn de PCR, formular procediments operatius de PCR estàndard i cultivar la consciència operativa rigorosa dels experimentadors són les claus per prevenir o reduir la contaminació dels experiments de PCR.


Hora de publicació: 12-agost-2021