Els anticossos, també anomenats immunoglobulines (Ig), són glicoproteïnes que s'uneixen específicament als antígens.
 
La preparació d'anticossos convencionals es produeix immunitzant animals i recollint antisèrum.Per tant, l'antisèrum sol contenir anticossos contra altres antígens no relacionats i altres components proteics del sèrum.Les molècules d'antigen general contenen majoritàriament múltiples epítops diferents, de manera que els anticossos convencionals també són una barreja d'anticossos contra múltiples epítops diferents.Fins i tot els anticossos sèrics convencionals dirigits contra el mateix epítop encara estan compostos per anticossos heterogenis produïts per diferents clons de cèl·lules B.Per tant, els anticossos sèrics convencionals també s'anomenen anticossos policlonals, o anticossos policlonals per abreujar.
 
L'anticòs monoclonal (anticòs monoclonal) és un anticòs altament uniforme produït per un sol clon de cèl·lules B i només dirigit contra un epítop específic.Normalment es prepara mitjançant la tecnologia d'hibridoma: la tecnologia d'anticossos d'hibridoma es basa en la tecnologia de fusió cel·lular, combinant cèl·lules B amb la capacitat de segregar anticossos específics i cèl·lules de mieloma amb capacitat de creixement infinita en hibridomes de cèl·lules B.Aquesta cèl·lula d'hibridoma té les característiques d'una cèl·lula mare.Pot proliferar de manera indefinida i immortal in vitro com les cèl·lules del mieloma, i pot sintetitzar i segregar anticossos específics com els limfòcits esplènics.Mitjançant la clonació es pot obtenir una línia monoclonal derivada d'una única cèl·lula d'hibridoma, és a dir, una línia cel·lular d'hibridoma.Els anticossos que produeix són anticossos molt homogenis contra el mateix determinant antigènic, és a dir, anticossos monoclonals.
 
Els anticossos existeixen com un o més monòmers en forma d'Y (és a dir, anticossos monoclonals o anticossos policlonals).Cada monòmer en forma d'Y es compon de 4 cadenes polipeptídiques, incloses dues cadenes pesades idèntiques i dues cadenes lleugeres idèntiques.La cadena lleugera i la cadena pesada s'anomenen segons el seu pes molecular.La part superior de l'estructura en forma d'Y és la regió variable, que és el lloc d'unió de l'antigen.(Fragment de Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Estructura d'anticossos
Cadena pesada
Hi ha cinc tipus de cadenes pesades d'Ig de mamífers, anomenades amb les lletres gregues α, δ, ε, γ i μ.Els anticossos corresponents s'anomenen IgA, IgD, IgE, IgG i IgM.Les diferents cadenes pesades es diferencien en mida i composició.α i γ contenen aproximadament 450 aminoàcids, mentre que μ i ε contenen aproximadament 550 aminoàcids.
Cada cadena pesada té dues regions: la regió constant i la regió variable.Tots els anticossos del mateix tipus tenen la mateixa regió constant, però hi ha diferències entre anticossos de diferents tipus.Les regions constants de les cadenes pesades γ, α i δ estan compostes per tres dominis Ig en tàndem, amb una regió frontissa per augmentar la seva flexibilitat;les regions constants de les cadenes pesades μ i ε estan compostes per 4 dominis Ig.La regió variable de la cadena pesada de l'anticossos produït per diferents cèl·lules B és diferent, però la regió variable de l'anticòs produïda per la mateixa cèl·lula B o clon de cèl·lules és la mateixa, i la regió variable de cada cadena pesada té una longitud d'uns 110 aminoàcids., I formen un únic domini Ig.
 
Cadena lleugera
Només hi ha dos tipus de cadenes lleugeres en mamífers: tipus lambda i tipus kappa.Cada cadena lleugera té dos dominis enllaçats: una regió constant i una regió variable.La longitud de la cadena lleugera és d'uns 211 ~ 217 aminoàcids.Les dues cadenes lleugeres que conté cada anticòs són sempre les mateixes.Per als mamífers, la cadena lleugera de cada anticòs només té un tipus: kappa o lambda.En alguns vertebrats inferiors, com els peixos cartilaginosos (peixos cartílags) i els peixos ossis, també es troben altres tipus de cadenes lleugeres com el tipus iota (iota).
 
Segments Fab i Fc
El segment Fc es pot combinar directament amb enzims o colorants fluorescents per marcar anticossos.És la part on l'anticossos es reblona a la placa durant el procés ELISA, i també és la part on es reconeix i s'uneix el segon anticòs en immunoprecipitació, immunoblotting i immunohistoquímica.Els anticossos es poden hidrolitzar en dos segments F(ab) i un segment Fc per enzims proteolítics com la papaïna, o es poden trencar de la regió frontissa per la pepsina i hidrolitzar-los en un segment F(ab)2 i un segment Fc.Els fragments d'anticossos IgG de vegades són molt útils.A causa de la manca del segment Fc, el segment F(ab) no precipitarà amb l'antigen, ni serà capturat per cèl·lules immunitàries en estudis in vivo.A causa dels petits fragments moleculars i la manca de funció de reticulació (a causa de la manca de segment Fc), el segment Fab s'utilitza normalment per al radiomarcatge en estudis funcionals, i el segment Fc s'utilitza principalment com a agent de bloqueig en la tinció histoquímica.
 
Regions variables i constants
La regió variable (regió V) es troba a 1/5 o 1/4 (que conté uns 118 residus d'aminoàcids) de la cadena H prop de l'extrem N-terminal i 1/2 (que conté uns 108-111 residus d'aminoàcids) prop de l'extrem N de la cadena L.Cada regió V té un anell peptídic format per enllaços disulfur intracadenes, i cada anell peptídic conté aproximadament entre 67 i 75 residus d'aminoàcids.La composició i la disposició dels aminoàcids a la regió V determinen l'especificitat d'unió a l'antigen de l'anticòs.A causa dels tipus i la seqüència d'aminoàcids en constant canvi a la regió V, es poden formar molts tipus d'anticossos amb diferents especificitats d'antigen d'unió.Les regions V de la cadena L i la cadena H s'anomenen VL i VH, respectivament.En VL i VH, la composició i la seqüència d'aminoàcids d'algunes regions locals tenen un major grau de variació.Aquestes regions s'anomenen regions hipervariables (HVR).La composició d'aminoàcids i la disposició de les parts que no són HVR a la regió V són relativament conservadores, que s'anomena regió marc.Hi ha tres regions hipervariables en VL, normalment situades als residus d'aminoàcids 24 a 34 i 89 a 97 respectivament.Els tres HVR de VL i VH s'anomenen HVR1, HVR2 i HVR3, respectivament.La investigació i l'anàlisi de la difracció de cristalls de raigs X van demostrar que la regió hipervariable és efectivament el lloc on s'uneix l'antigen de l'anticòs, per la qual cosa s'anomena regió determinant de la complementarietat (CDR).Els HVR1, HVR2 i HVR3 de VL i VH es poden anomenar CDR1, CDR2 i CDR3 respectivament.En general, el CDR3 té un grau d'hipervariabilitat més alt.La regió hipervariable també és el lloc principal on existeixen els determinants idiotípics de les molècules d'Ig.En la majoria dels casos, la cadena H té un paper més important en la unió a l'antigen.
La regió constant (regió C)es troba a 3/4 o 4/5 (aproximadament des de l'aminoàcid 119 fins al terminal C) de la cadena H prop de l'extrem C i 1/2 (conté uns 105 residus d'aminoàcids) prop de l'extrem C de la cadena L.Cada regió funcional de la cadena H conté uns 110 residus d'aminoàcids i conté un anell peptídic format per 50-60 residus d'aminoàcids connectats per enllaços disulfur.La composició i la disposició d'aminoàcids d'aquesta regió són relativament constants en la mateixa cadena d'isotip L d'Ig animal i en la mateixa cadena de tipus H.El mateix, només es pot unir específicament a l'antigen corresponent, però l'estructura de la seva regió C és la mateixa, és a dir, té la mateixa antigenicitat.L'anticòs secundari (o anticòs) anti-IgG humana de cavall es pot combinar amb els dos Es produeix una combinació d'anticossos (IgG) contra diferents exotoxines.Aquesta és una base important per preparar anticossos secundaris i aplicar fluoresceïna, isòtops, enzims i altres anticossos marcats.
 
 
Productes relacionats:
Kit Cell Direct RT-qPCR