Protocol de kit de PCR directe de teixit animal (sense eines de mostreig).
Descripció del kit:
Utilitzeu directament el lisat de teixit animal com a plantilla per a l'amplificació per PCR, sense extracció separada d'ADN, ràpid i d'alta sensibilitat.
◮No es requereix una purificació d'ADN costosa i que requereix molt de temps.
◮La demanda de mostra és petita, només cal prendre una sola llavor.
◮No calen tractaments especials com la mòlta i la trituració, i el funcionament és senzill.
◮El sistema de PCR optimitzat permet que la PCR tingui una especificitat més alta i una tolerància més forta als inhibidors de la reacció de PCR.
Descripcions
Aquest kit utilitza un sistema tampó de lisi únic per alliberar ràpidament ADN genòmic de mostres de teixit animal per a reaccions de PCR, de manera que és especialment adequat per a proves genètiques a gran escala.
El procés d'alliberament de l'ADN genòmic del tampó de lisi es completa en 10-30 minuts a 65 °C.No calen altres processos com l'eliminació de proteïnes i ARN, i el traça d'ADN alliberat es pot utilitzar com a plantilla per a la reacció de PCR.
2 × PCR fàcilTMLa barreja té una forta tolerància als inhibidors de la reacció de PCR i pot utilitzar el lisat de la mostra a provar com a plantilla per a una amplificació eficient i específica.Aquest reactiu conté Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tampó de reacció, optimitzador i estabilitzador de PCR.
D-Taq DNA polimerasa és una DNA polimerasa desenvolupada especialment per Foregene per a reaccions directes de PCR.D-Taq DNA polimerasa té una forta tolerància a una varietat d'inhibidors de la reacció de PCR i pot amplificar eficaçment traces d'ADN en diversos sistemes de reacció complexos, i la velocitat d'amplificació pot arribar als 2 Kb/min, que és especialment adequat per a la reacció de PCR directa.
Especificacions
50 × 20 µl rxns, 200 × 20 µl rxns, 500 × 20 µl rxns, 2000 × 20 µl rxns
Components del kit
| Part I | Tampó AL |
| Proteasa del gen anterior | |
| 6 × Tampó de càrrega d'ADN | |
| Part II | 2 × PCR fàcilTMBarrejar |
Característiques i avantatges
■Sense purificació d'ADN costosa i que requereix molt de temps
■ La demanda de mostra és petita, només es poden provar 5 mg de teixit animal.
■ No es requereix cap tractament especial com ara la mòlta i la trituració, i el funcionament és senzill.
■ El sistema de PCR optimitzat fa que la PCR tingui una especificitat més alta i una tolerància més forta als inhibidors de la reacció de PCR.
Paràmetres del kit
Aplicació: una varietat de teixits animals.
ADN alliberat de la lisi de la mostra: només s'utilitza com a plantilla de PCR.
El kit es pot utilitzar per a les següents finalitats: identificació de transgenosi, genotipat animal, etc.
Flux de treball
Emmagatzematge i vida útil
La part I d'aquest kit s'ha d'emmagatzemar a les 2-8℃.
El reactiu Buffer AL es pot emmagatzemar durant 12 mesos en condicions seques;es pot emmagatzemar a 2-8℃per a un emmagatzematge més llarg.
El reactiu Foregene Protease té una fórmula única.Per garantir la seva activitat i estabilitat, guardeu-lo a 4℃durant 12 mesos.
Reactiu 6×El tampó de càrrega d'ADN es pot emmagatzemar a 4℃o -20℃durant molt de temps.
La part II d'aquest kit s'ha d'emmagatzemar a -20℃.
Reactiu 2×PCR fàcilTMLa barreja es pot emmagatzemar durant 12 mesos a -20℃;si s'utilitza amb freqüència, també es pot emmagatzemar a 4℃per a l'emmagatzematge a curt termini (utilitzar-lo en un termini de 10 dies).
